สมเด็จพระนางเจ้าสิริกิติ์ พระบรมราชินีนาถ พระบรมราชชนนีพันปีหลวง ทรงเป็นพุทธมามกะที่เคร่งครัดและมีพระราชปฏิบัติอันงดงามยิ่งในทางพระศาสนา ทรงนำธรรมะมาเป็นแนวทางของพระราชดำริและพระราชกรณียกิจต่าง ๆ อยู่เสมอ ทรงพระกรุณาเสด็จพระราชดำเนินไปในทางศาสนาอยู่เนือง ๆ และพระราชทานพระราชทรัพย์แก่วัดน้อยใหญ่ในพระราชอาณาจักรเพื่อเป็นค่าใช้จ่ายของวัด ทรงปวารณาพระองค์ต่อพระเถระผู้ใหญ่หลายรูปว่าทรงขออุปัฏฐากดูแลพระเถระเหล่านั้น เช่น มีพระราชเสาวนีย์ให้จัดภัตตาหารที่สมควรไปถวายพระสงฆ์ที่ชราหรืออาพาธเป็นประจำ ทรงเป็นพระราชธุระดูแลพระสงฆ์อาพาธที่ไร้ญาติโยมโดยโปรดเกล้าฯ พระราชทานพระบรมราชานุเคราะห์ในการรักษาพยาบาล พระสงฆ์บางรูปพิการจนช่วยเหลือตนเองไม่สะดวก ก็ทรงพระกรุณาจัดให้มีคนดูแลและพระราชทานค่าใช้จ่ายทั้งของพระสงฆ์รูปนั้นรวมทั้งผู้ดูแล
พระราชอิริยาบถของสมเด็จพระนางเจ้าสิริกิติ์ พระบรมราชินีนาถ พระบรมราชชนนีพันปีหลวง ในการกราบและน้อมไหว้สักการะพระพุทธ พระธรรม พระสงฆ์นั้น แสดงออกถึงความเคารพอย่างสูงสุดจากพระราชหฤทัย ทรงสวดมนต์ไหว้พระและทรงทำสมาธิภาวนาเป็นปฏิบัติบูชาอยู่เป็นนิจ ทรงจัดดอกไม้บูชาพระด้วยพระองค์เอง และโปรดให้บันทึกเสียงพระธรรมเทศนาของพระเถระผู้ใหญ่มาทรงฟัง นอกจากจะทรงใฝ่ในพระธรรมอันวิเศษของศาสนาแล้ว ยังโปรดที่จะพระราชทานธรรมะเผื่อแผ่ไปยังผู้อื่น เช่น พระราชทานเทปธรรมมะแก่ผู้ป่วยเจ็บหรือผู้ที่สนใจธรรม เป็นต้น